Strep-tag是一種在蛋白純化系統(tǒng)中應(yīng)用廣泛的親和標(biāo)簽。它包括兩種類型Strep-tag II和Twin Strep-tag II。Strep-tag II是一個(gè)短肽標(biāo)簽,由8個(gè)氨基酸(WSHPQFEK)組成,可以作為N端或C端標(biāo)簽與蛋白質(zhì)融合,對(duì)重組蛋白的影響很小。進(jìn)一步改進(jìn)的Twin Strep-tag II是一個(gè)順序排列的兩個(gè)Strep-tag II序列(通過(guò)內(nèi)部氨基酸連接),該標(biāo)簽?zāi)軌蛳馭trep-tag II一樣進(jìn)行溫和、快速的純化。這兩個(gè)標(biāo)簽可以自由結(jié)合Streptactin和STarm Sterptactin中的任一配體。標(biāo)簽/配體的結(jié)合取決于所需的結(jié)合強(qiáng)度和應(yīng)用。這兩個(gè)標(biāo)簽和Streptaction和STarm Sterptaction的親和力在μg/ml范圍內(nèi),這種高親和性是任何其他現(xiàn)有親和性標(biāo)記系統(tǒng)都無(wú)法實(shí)現(xiàn)的。此外,這種結(jié)合標(biāo)簽和配體的靈活性允許在生理?xiàng)l件下純化重組蛋白。
Strep-tag標(biāo)記技術(shù)可用于從各種表達(dá)系統(tǒng)中純化功能性鏈球菌標(biāo)記蛋白,包括桿狀病毒、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、酵母和細(xì)菌。該技術(shù)可耐受不同的緩沖條件和添加劑(高鹽、洗滌劑、還原劑、金屬離子和螯合劑),普遍適用于大部分蛋白質(zhì)性質(zhì),而且方便于蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)質(zhì)檢相互作用分析。一般來(lái)說(shuō),上述兩種標(biāo)簽都不干擾目標(biāo)蛋白的折疊或生物活性,不與重金屬離子反應(yīng),不具有離子交換特性,也不會(huì)引起蛋白質(zhì)聚集。因此,純化后無(wú)需去除Strep-tag II和Twin Strep -tag II。此外,Twin Strep -tag II/STarm Sterptaction組合適用于固定化和檢測(cè)分析應(yīng)用,如ELISA或SPR。這種多功能性使得Strep-tag標(biāo)記技術(shù)優(yōu)于其他可用的基于標(biāo)記的親和純化系統(tǒng)。
STarm Streptactin Beads 4FF的配體蛋白是Streptactin的突變體,其偶聯(lián)至高度交聯(lián)的4%瓊脂糖微球上。樣品中低濃度(50 μmol/L)的D-生物素不會(huì)影響目的蛋白和STarm Streptactin Beads 4FF的結(jié)合效果。該產(chǎn)品在使用后可用平衡液再生,或者使用10 mM NaOH進(jìn)行一定程度的清洗。介質(zhì)具體性能見(jiàn)下表。
? 產(chǎn)品性能
項(xiàng)目 | 性能 |
基質(zhì) | 高度交聯(lián)的4%瓊脂糖凝膠 |
配體 | Streptactin Mutant |
載量 | 4 mg twin Strep-tag II蛋白 /ml 介質(zhì) |
微球粒徑 | 45-165 μm |
流速上限 | 300 cm/h |
儲(chǔ)存緩沖液 | 含20%乙醇的1×PBS |
儲(chǔ)存溫度 | 2-8℃ |
? 訂購(gòu)信息
名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
STarm Streptactin Beads 4FF | SA092005 | 5 ml |
SA092025 | 25 ml | |
SA092100 | 100 ml | |
SA092500 | 500 ml | |
SA09201L | 1 L | |
SA09210L | 10 L |
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