案例分類
抗體是實現免疫功能的重要分子,主要包括IgG1-4、IgA、IgD、IgE、IgM和IgY(禽類)等,可以特異性的結合抗原,實現免疫功能。由于優秀的特異性和生物活性,抗體也在檢測、生物分子提取、疫苗、靶向治療藥物開發等領域起著不可替代的作用。為了獲取更高的活性/特異性或者實現一些特殊的功能,對抗體的改造是非常常見的情況,現在已經成為一個高度發展的領域。
在抗體的純化過程中,ProteinA/G/L親和層析是其中最關鍵的步驟。親和層析被要求具備高載量、長壽命、低的配體脫落率和雜質殘留、以及耐受高濃度NaOH清洗。精純化需要按照質量需求靈活設計,較多采用“陰離子+陽離子”或“復合模式層析”,也有使用單步疏水層析進行純化的情況。
目前雙抗的層析純化與單抗基本相同,但工藝開發難度更大,所花費的精力要多于單抗。這主要是因為雙抗在表達過程中分子有更高的錯配幾率,聚體含量甚至可以達到50%。