Sumo Protease為釀酒酵母ULP1蛋白酶的原核表達產物,特異性識別釀酒酵母的類泛素蛋白(ubiquitin-like protein, Sumo),并在Sumo標簽和融合蛋白之間進行切割。該酶識別Sumo標簽的三級結構,因此具有極高的特異性。Sumo蛋白酶在多種溫度以及pH 7-9條件下,均可以有效剪切,同時可以耐受一定濃度的咪唑,EDTA,尿素,SDS等抑制成分,使用方便,在多種緩沖液中均可完成酶解。其本身帶有一個His-tag標簽,酶切后可以方便地除去。還需要注意的是:釀酒酵母來源的SUMO蛋白表達系統是已知最好的促進原核可溶表達的系統之一,遠比Ubiquitin,GST,MBP,TRX等系統更加出色。
產品包裝和儲存
Sumo protease,濃度1 mg/ml,酶活>600 U/μg。長時間可存放于-20℃或-80℃。大包裝用前可分裝成小管,請勿反復凍融。
注:一個酶活單位定義為:在50 mM Tris,150 mM NaCl,1 mM DTT,pH 8.0酶切緩沖液中,30℃反應1h,酶切>90%的100 pmol標準底物(SUMO-融合蛋白)
酶切能力
在酶切緩沖液中酶切100 μg融合蛋白,反應條件為5℃、16小時、酶切效率≥90%,僅需要0.5μg蛋白酶。在30℃條件下、0.5小時、1 μg Sumo蛋白酶可以酶切200 μg 融合蛋白,酶切效率≥90%。在酶切反應過程中,建議先用不同的酶切時間摸索最佳條件,用SDS-PAGE電泳來評估酶切程度。確定酶切融合蛋白需要的Sumo蛋白酶用量。溫度和溫浴的時間可以根據不同的目標蛋白而進行改變,應該在實驗過程中優化酶切條件。
酶切緩沖液
50 mM Tris,150 mM NaCl,1 mM DTT,pH 8.0(僅有緩沖液即可酶切,例如可以使用10 mM Tris-HCl,pH 8.0)。
? 訂購信息
名稱 | 貨號 | 規格 |
Sumo Protease | SLP00700 | 1 mg |
SLP00701 | 10 mg | |
SLP00702 | 100 mg | |
SLP00703 | 500 mg | |
SLP00704 | 1 g |