大腸桿菌是實驗室最常用的革蘭氏陰性菌原核表達體系。革蘭氏陰性菌的細胞壁由內(nèi)外兩層脂雙層細胞膜夾雜一層肽聚糖組成。肽聚糖的糖鏈部分由高度重復(fù)二糖單元構(gòu)成（N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸以beta-1,4糖苷鍵連接），肽聚糖的肽段部分通常是通過丙氨酸的氨基和胞壁酸的羧基形成酰胺鍵，不同肽段的側(cè)鏈之間再形成直接的交聯(lián)。

常見的大腸桿菌裂解方法有兩大類，兩類方法都是通過破壞細胞壁的內(nèi)外脂雙層膜以及肽聚糖的完整結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)細菌的裂解。1）物理方法，包括了超聲法、均質(zhì)法、研磨法、凍融法。物理方法的優(yōu)勢在于不引入雜質(zhì)成分、成本低、效率高。超聲破碎法是當前實驗室中裂菌（0.5-5L培養(yǎng)物）的首選；工業(yè)級別的大體積高密度發(fā)酵菌體通常使用均質(zhì)破碎方法，此方法可以一小時處理10L以上菌體而無需耗材。研磨法和凍融法由于處理通量和效率的限制，往往只在特定的實驗中使用。2）化學(xué)方法，包括了有機溶劑法、酸堿裂菌法、溶菌酶消化法。化學(xué)方法的優(yōu)勢在于不受體積的限制，可以處理微升級別樣品。其中酸堿裂菌法速度快、效率高，但條件劇烈不適合維持蛋白的天然構(gòu)象，此方法在質(zhì)粒抽提中運用最為廣泛。有機溶劑法也易造成蛋白的失活，僅適合特定應(yīng)用方向。

飛刀^?快速裂菌試劑盒（CutE.coli Lysis Kit）可用于大腸桿菌(E.coli)等革蘭氏陰性菌的快速、溫和、低成本裂解，釋放胞內(nèi)蛋白以及消化核酸。產(chǎn)品操作簡單、重復(fù)性好，可有效降低裂菌上清粘度，保障后續(xù)蛋白純化。飛刀^?快速裂菌試劑盒的A液含有復(fù)合溶菌酶，可以在細菌細胞壁的不同位置高效切開裂口，實現(xiàn)胞內(nèi)蛋白的完美釋放。菌體破裂以后，胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、小分子、DNA、RNA都會釋放到胞外，此時需要將核酸充分打斷，否則帶有強負電性的核酸將和目的蛋白以及雜質(zhì)相互作用，導(dǎo)致純化的產(chǎn)物純度降低，并堵塞純化填料，降低柱效并影響填料的使用壽命。在超聲和均質(zhì)破菌方法中，物理的剪切力無差別的打斷肽聚糖、核酸以及蛋白質(zhì)，為降低樣品粘度，通常要多次超聲或者均質(zhì)。過度的物理作用不僅會造成特定的目的蛋白斷裂，導(dǎo)致純化產(chǎn)物出現(xiàn)降解條帶，也會因為熱量的作用造成蛋白質(zhì)的活力喪失。飛刀^?快速裂菌試劑盒的B組分為重組超級核酸酶，它可以快速切斷DNA、RNA使之降解成100bp以下的小片段，同時不會影響目的蛋白的一級序列以及高級結(jié)構(gòu)的完整。因此使用本試劑盒提取蛋白，不會造成目的蛋白的“額外”破壞，是一種溫和、快速、高效的破菌方案。

下方圖片展示的是超聲裂菌和飛刀TM快速裂菌試劑盒裂菌的純化對比結(jié)果：

產(chǎn)品主要用途：

多樣本小量coli細菌的快速裂解，后續(xù)可接小量誘導(dǎo)表達的蛋白可溶性檢測；

多樣本中量coli細菌的快速裂解, 后續(xù)可接蛋白純化、性質(zhì)表征；

大量coli細菌的快速裂解，降低樣品粘度，提高規(guī)模制備效率以及蛋白純度；

其它革蘭氏陰性菌的輔助裂菌。

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